1931年9月17日生于纽约布朗克斯，原名安娜·玛丽亚·路易斯·伊塔里亚诺。四岁开始在舞台上表演舞蹈，后在美国戏剧学院学习表演，又进美国演员研修所深造。1950年她用安妮·马诺的名字首次作职业性演出。1952年演出了她的第一部影片《不必费心忙碌》，扮演一个小角色。以后的几年时间里，安妮·班克劳夫特在好莱坞拍了一些B级片，只有在《最后的边界》(1956)里扮演骑兵上校的妻子一角，尚有些深度。1958年去纽约，先后主演了两部由威廉·吉布森编写的舞台剧《你上我下》和《奇迹创造者》。前者同亨利·方达合演，她因演技精湛而获得托尼奖。后者描写美国盲聋女教育家海伦·凯勒童年的一段生活，她扮演女教师安妮·沙利文一角，感人的演技使她获得纽约戏剧评论奖和第二个托尼奖。这两出戏都是由阿瑟·佩恩执导。1962年《奇迹创造者》搬上银幕，仍由佩恩担任导演，他坚持仍由安妮·班克劳夫特扮演安妮·沙利文，她又以出色的演技获得第三十五届奥斯卡最佳女主角金像奖以及全美电影评议会最佳女主角奖和英国电影与电视艺术学院的最佳外国女演员奖。
安妮·班克劳夫特在六十年代还演了两部获得很高评价的影片，一是英国片《吃南瓜的女人》(即《太太