马军勤1953年出生于江苏省南京市。15岁初中毕业后到苏北农村插队。1976年返回南京后当了一名裱画工。1981年马军勤考进话剧团，成为一名专业演员。
1986年，湖南电视台推出18集电视连续剧《乌龙山剿匪记》，摘得当年电视剧“飞天奖”，而马军勤因在该剧中主演女主角田秀姑，获电视“金鹰奖“最佳女主角提名，以及中国“十佳”电视演员提名，一时间名扬江南，又把她的事业推到一个新的高峰。
在演好戏的同时，马军勤还苦练演员的文化“内功”，于1991年考进合肥联合大学，1996年加入省作家协会，著有散文《花的故事》、《夕阳不落》、《我和露易莎》、《比》、《永远的南京时间》等佳作，相继获得第二届华东地区市报副刊好作品一等奖、江苏省报纸副刊好作品一等奖等大奖。
马军勤从艺多年，共拍摄影视剧200多部集，发表散文作品20余万字。
电影作品
1980年《珊瑚岛上的死光》 饰梦娜
1981年《宝贝》 饰李克
1985年《梅山奇案》 饰吴菊妹
1986年《镖王》 饰翠花
1986年《响马县长》 饰杨八姑
1991年《大围捕》 饰钟妻
2007年《江北好人》 饰维扬妈（导演 刘新）
2009年《孽缘》 饰保全妈
电视剧集
1987年《乌龙